Особенности определения резус-фактора и пола плода по материнской крови методом ПЦР, кому показан и когда его можно проводить?

Особенности определения резус-фактора и пола плода по материнской крови методом ПЦР, кому показан и когда его можно проводить?

Генетический маркер, используемый для определения резус-фактора плода по фетальной ДНК. Анализ выполняется только с 10-й недели беременности при отрицательном резус-факторе беременной женщины.

Синонимы русские

Выявление наличия/отсутствия 7-го и 10-го экзонов гена RHD; генотипирование гена RHD по фетальной ДНК.

Синонимы английские

Fetal RHD genotyping test.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь беременной женщины с серологическим отрицательным резус-фактором с 10-й недели беременности.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

С точки зрения иммунологии беременность на всём протяжении рассматривается как процесс смены этапных иммунных конфликтов. В основном эти конфликты являются нормальными физиологическими процессами и не только не оказывают патологического воздействия на организм матери и плода, но и помогают нормальному течению беременности. С их помощью реализуются такие этапы беременности, как имплантация плода, формирование гормонального фона беременности и, конечно, сами роды. Кроме того, существует ряд патологических конфликтов, которые могут существенно осложнять течение нормальной беременности, иногда приводя к летальному исходу. Одним из них является резус-конфликт между матерью и плодом.

Система резус (Rh) – одна из самых полиморфных и иммуногенных систем, известных у людей; она представлена группой белковых молекул, расположенных на поверхностной мембране эритроцитов. Наиболее изученными белками (антигенами) этой группы являются антигены D, C, c, E и e, которые кодируются генами RHD и RHCE, расположенными на хромосоме 1. Наличие в геноме гена RHD приводит к появлению на эритроцитах антигена D, что соответствует резус-положительному фенотипу (Rh+). Резус-отрицательный фенотип (Rh-) формируется в результате отсутствия обоих гомологичных аллелей гена RHD.

Важнейший фактор возникновения резус-конфликта при беременности – формирование резус-положительного плода у резус-отрицательной матери. Несмотря на то что кровоток плода и матери разделены плацентой, фрагменты клеток и ДНК плода (фетальная ДНК) могут проходить через неё. Проницаемость плаценты может увеличиваться при ряде патологических процессов: гестоз, заболевания матки, прием лекарственных препаратов, соматическая патология и т.д. При попадании в кровь матери антигенов D плода на них вырабатываются резус-антитела (RhAb). Для матери они безвредны, но, проходя обратно через плаценту, они инициируют развитие гемолитической болезни плода и новорождённого путем связывания с эритроцитами плода и последующим их разрушением. Такие состояния являются фактором риска перинатальной смертности, что подчеркивает необходимость ранних диагностических и превентивных терапевтических стратегий сохранения жизнеспособности плода.

В настоящее время существует два основных метода определения резус-фактора. Первый метод – серологический – подразумевает выявление антигена D на поверхности эритроцитов с помощью специфических антител. Он подходит для широкого рутинного обследования. К существенным ограничениям этого метода относятся: 1) необходимость наличия для исследования живых эритроцитов, что делает невозможным использование его в пренатальной диагностике резус-фактора плода; 2) наличие мутации внутри гена RHD либо изменение уровня его экспрессии. В данных случаях серологическое исследование может дать ложноотрицательный результат (Rh- при наличии гена RHD), так как диагностические антитела не смогут связаться с поврежденными или отсутствующими молекулами антигена D.

Читайте также:
Температура без насморка и кашля у ребенка, простуда без кашля и насморка у детей.

Альтернативой серологическому исследованию резус-фактора служит генотипирование на наличие или отсутствие гена RHD. В случае пренатальной диагностики в качестве материала для исследования используется фетальная ДНК, выделенная из крови матери. Генотипирование проводится по нескольким фрагментам (7-й и 10-й экзоны) гена. Необходимое условие, увеличивающим специфичность данного метода, – его использование на сроках 10 и более недель беременности у серологически резус-отрицательных женщин. Основным методом генотипирования в данном случае является полимеразная цепная реакция, выявляющя наличие или отсутствие гена RHD в материале.

С учетом того что концентрация фетальной ДНК в крови матери крайне низкая, а также с учетом возможности наличия серологического ложноотрицательного резус-фактора у матери и наличия мутаций в гене RHD генотипирование резус-фактора плода проводят, исследуя ряд показателей: 1) наличие/отсутствие не менее двух фрагментов (7-й и 10-й экзоны) гена RHD; 2) с учетом сигнала от геномной ДНК матери.

Для чего используется исследование?

  • Для прогнозирования развития резус-конфликта между резус-положительным плодом и резус-отрицательной матерью.
  • Для решения вопроса о стратегии профилактики гемолитической болезни плода и новорождённого.

Когда назначается исследование?

C 10-й недели беременности.

Что означают результаты?

В процессе исследования формируется четыре типа заключения.

1. Отсутствие обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне достаточного количества сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется отрицательный резус-фактор плода у резус-отрицательной матери. Данное состояние не требует терапевтической коррекции.

2. Наличие обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне высокого количества сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется положительный резус-фактор плода у резус-отрицательной матери. Данное состояние может вызывать резус-конфликт (особенно при повторных беременностях) и требует терапевтической коррекции. Следует отметить, что у матери должен быть серологически подтвержденный отрицательный резус.

3. Наличие обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне равного количества сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется, возможно, положительный генетически резус-фактор у матери, резус-фактор плода идентифицировать не представляется возможным.

4. Наличие слабого сигнала обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне слабого сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется сомнительный результат. Наличие слабого сигнала геномной ДНК, независимо от сигнала с обоих фрагментов гена RHD, либо наличие одного из двух фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне высокого количества сигнала геномной ДНК указывает на недостоверный результат. Во всех этих случаях требуется проведение повторного исследования.

Что может влиять на результат?

  • На получение достоверного результата может повлиять наличие у матери серологического ложно-отрицательного результата (Rh- при наличии гена RHD) вследствие наличия мутаций внутри гена RHD либо изменение уровня его экспрессии.
  • Срок исследования менее 8-10 недель беременности.
  • Малое количество фетальной ДНК, например при патологии плаценты.

Важные замечания

Данное исследование должно проводиться при каждой беременности у резус-отрицательной матери.

Особенности определения резус-фактора и пола плода по материнской крови методом ПЦР, кому показан и когда его можно проводить?

1 ГБОУ Самарский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, Самара

Читайте также:
МРТ грудного отдела позвоночника - что показывает? Ответ здесь!

Возможности пренатальной диагностики постоянно растут и совершенствуются. К одному из видов пренатальной диагностики можно смело отнести инновационное направление – неинвазивную пренатальную диагностику по крови беременной женщины. Это новый метод, который открывает широкие возможности для современной медицины.Определение резус-фактора плода по крови резус-отрицательной матери – наиболее хорошо изученная его часть. Диагностика резус-фактора плода ранее вызывала затруднения и была возможна с 20 недели беременности путем амниоцентеза или кордоцентеза. Данная процедура опасно как для матери, так и для плода. Благодаря новому инновационному методу неинвазивной пренатальной диагностики резус-фактора плода по крови матери удастся улучшить качество оказания медицинской помощи резус-отрицательным беременным женщинам и снизить процент резус-сенсибилизированных женщин в России.

1. Коноплянников А.Г. Новые технологии в диагностике, лечении и профилактике гемолитической болезни плода и новорожденного: автореф. дис. . д-ра мед. наук. – М., 2009. – 48 с.

2. Маркелова А.Н., Тюмина О.В., Тороповский А.Н. Новый подход к ведению беременных женщин с резус-отрицательной кровью с ранних сроков беременности // Фундаментальные исследования. – 2011 – № 11 (Ч. 2) – С. 330–332.

3. Митря И.В. Оптимизация методов профилактики, диагностики и лечения резус-сенсибилизации: автореф. дис. . канд. мед. наук. – М., 2010. – 21 с.

4. Современные методы диагностики, лечения гемолитической болезни плода и новорожденного при резус-сенсибилизации: пособие для врачей / Г.М. Савельева, М.А. Курцер, О.Б. Панина, Л.Г. Сичинова, Р.И. Шалина, П.А. Клименко, А.Г. Коноплянников и др.. – М.: Изд-во МЗ РФ, 2004. – 28 с.

5. Сидельникова В.М. Гемолитическая болезнь плода и новорожденного. – М.: Изд-во «Триада-Х», 2004. – 192 с.

6. Bianchi D.W., Wiliams J.M., Sulivan L.M., Hanson F.W., Klinger K.W., Shuber A.P. PCR quantitation of fetal cells in maternal blood in normal and aneuploidy pregnancies. Am J Hum Genet 1997; 61: 822–829

7. Lo Y.M.D., Lo E.S., Watson N., NoakesL., Sargent I.L., Thiaganathan B., Wainscoat J.S.. Two-day cell traffic between mother and fetus: biologic and clinical implications. Blood. 1996; 88: 4390–4395.

8. Lo Y.M.D., Hjelm NM, Fidler C., Sargent I.L., Murphy M.F., Chambelain P.F., Poon P.M.K., Redman C.W.G., Wainscoat J.S.. Prenatal diagnosis of fetal RHd status by molecular analisis of maternal plasma National England journal of medicine. 1998; 339: 1734–1738.

В России процент резус-сенсибилизированных женщин достигает 1,2 % (Сидельникова В.М. и соавт. 2004; Савельева Г.М. и соавт., 2004). В развитых странах мира количество женщин c Rh-сенсибилизацией равно 0,1-0,2 %. Столь низкий процент достигнут благодаря внедрению в клиническую практику специфической профилактики путем введения антирезус-иммуноглобулина несенсибилизированным резус-отрицательным женщинам. Разница в количестве сенсибилизированых женщин возникла по нескольким причинам, одна из которых – высокая стоимость антирезус-иммуноглобулина, покупать который приходится за свой счет. Хотя вводить данный препарат необходимо только тем резус-отрицательным беременным женщинам, чей плод является резус-положительным.

Вопреки мнению, что плацента образует барьер между матерью и ребенком, это не так (Loetal., 1996). Многочисленные исследования показали, что как целые клетки плода, так и внеклеточные фетальные ДНК проходят через плаценту и циркулируют в материнском кровотоке.

Читайте также:
Тест на определение овуляции Фраутест: инструкция по применению и достоверность результатов

Интактные фетальные клетки, циркулирующие в материнском кровотоке, являются привлекательной мишенью для неинвазивной пренатальной диагностики, а именно для диагностики резус-фактора плода, пола плода и хромосомных аномалий путем простого кариотипирования. Хотя существование фетальных клеток в материнской крови известно более века, непосредственно интактные фетальные ядерные красные кровяные клетки с целью пренатальной диагностики не использовались до 1990 года. С этого времени выделение и обнаружение клеток плода из крови матери начали интенсивно исследоваться, и стали появляться различные методы выделения фетальных клеток, которые были в разной степени успешными. Однако результаты исследований были неутешительные. Это было обу­- словлено недостаточностью интактных клеток плода, циркулирующих в материнском кровотоке (около 1 клетки в миллилитре материнской крови) (Bianchi и соавт., 1997), низкой эффективностью исследований (Bianchi и соавт., 1997). Хотя некоторые клетки плода (в частности ядерные красные кровяные клетки плода) имеют сравнительно короткую продолжительность жизни в материнской крови, фетальные клетки других типов могут сохраняться в материнской крови десятилетия после беременности и потенциально способны вызвать ложноположительные результаты при последующих беременностях. Таким образом, несмотря на то, что современные исследования пытаются улучшить технику сортировки клеток, большинство последних научных исследований сосредоточены на бесклеточной ДНК плода в крови матери, которая представлена в достаточном количестве (Lo и соавт.1998).

Огромное количетво человеческой ДНК расположено внутри клетки, но присутствие небольшого количества вкДНК в циркуляции и здоровых, и больных женщин было открыто в 1947 г. Хотя их биологический источник и потенциальная функция остаются неопределенными, предполагают, что это продукт апоптоза, в результате которого происходят фрагментация и выход хромосомных ДНК из клетки. Присутствие ДНК плода в материнской циркуляции была продемонстрировано Lo и соавторами в 1998 году.

Фетальные ДНК образуются путем апоптоза плацентарных клеток (трофобласта), полученных от и составляют примерно 3-6 % от общих бкДНК в материнском кровотоке в начале и конце беременности соответственно (Lo и соавт. 1998) (оставшиеся 94-97 % составляют материнские вкДНК).

ДНК плода можно обнаружить с 4-й недели гестации, хотя надежно только с 8 недели концентрация его возрастает с увеличением гестационного возраста- от 16 фетальных геномов на миллилитре крови матери в первом триместре беременности до 80 в третьем триместре) -с острым пиком в течение последних 8 недель беременности (Lo и др., 1998). В отличие от фетальных клеток, вкфДНК быстро выводится из крови матери с периодом полураспада 16 мин и не определяется через 2 ч после родов.

Цель исследования – оценить метод неинвазивной диагностики резус-фактора плода по крови беременной женщины.

Материалы и методы исследования

Для определения резус-фактора плода была использована фетальная ДНК из плазмы крови беременной резус-отрицательной женщины. В исследовании принимали участие 150 беременных резус-отрицательных женщин. Были использованы образцы венозной крови объемом 7 мл. В каждом случае женщины подписывали информированное согласие.

Для выявления гена резус-фактора применялась ПЦР в реальном времени с использованием диагностических наборов для идентификации гена резус-фактора плода в крови матери «ДНК-резус ребенка» производства ООО «Ген-технология» (Россия, РУ № ФСР2010/09565).

Читайте также:
Эспумизан L: назначение, состав, инструкция по применению и противопоказания

Определение резус-фактора плода по крови беременной резус-отрицательной женщины основывается на том, что в плазме крови беременной женщины присутствует внеклетчная фетальная ДНК.

Для правильного определения резус-фактора плода по крови беременной женщины необходимо соблюдение следующих условий:

1. Срок беременности – с 10 недель.

2. Правильное обращение с плазмой, выделение ДНК в максимально быстрые сроки.

3. Выделение ДНК с использованием надёжной технологии.

4. Организация работы в ПЦР-лаборатории согласно действующим национальным нормам.

5. Чёткое следование инструкции.

Исследование проводится в несколько этапов:

1. Взятие крови и выделение плазмы. Исследуемым материалом для проведения анализа является венозная кровь беременной резус-отрицательной женщины. Кровь сдаётся натощак, собирается в пробирку с антикоагулянтом EDTA в количестве 7-10 мл. В течение 24 ч с момента взятия крови следует отобрать плазму и перенести в новую пробирку. Плазма должна доставляться в лабораторию в течение 16-24 ч после взятия материала.

2. Выделение ДНК. Проводится колоночно-адсорбционным методом с использованием рекомендуемых комплектов наборов, предназначенных для выделения циркулирующих нуклеиновых кислот из биологических жидкостей согласно методике производителя.

3. Проведение амплификации с детекцией в режиме реального времени. Пробоподготовка – стандартная для проведения ПЦР. Подготавливаются реакции для непосредственного выявления гена резус-фактора в исследуемой пробе, а также контрольные реакции, подтверждающие правильность выполнения исследования. Реакция занимает от 1,5 до 2 часов (в зависимости от скорости изменения температуры амплификатором).

4. Регистрация и учёт результатов анализа.

Результаты исследования и их обсуждение

Все 150 женщин, вступившие в исследование, были резус-отрицательные по результатам серологического анализа. Для 115 из них стал известен резус-фактор рожденного ребенка.

Резус-фактор рожденных детей оценивался серологическим методом в роддоме.

ДНК-анализ 76 образцов указал на положительный резус-фактор плода, в 39 случаях был установлен отрицательный резус-фактор. Результаты анализа были подтверждены анализом крови детей после их рождения. В одном случае результат анализа не совпал (при отрицательном резус-факторе по данным тест-системы фактический резус-фактор оказался резус-положительным). Следует отметить, что срок беременности для этой пациентки составил 9 недель, в то время, как минимальным сроком, гарантирующим правильность результатов анализа, является срок 10 недель. Следовательно, данный результат не может использоваться при оценке аналитических характеристик тест-системы. У двух детей резус фактор был определен неправильно в роддоме. После полученния результата анализа на определение резус-фактора этих детей, не совпадающего с нашими результатами, у них был взят буккальный соскоб и проведено генетическое определение резус-фактора. Результат данного анализа подтвердил правильность определеного нами резус-фактора плода по крови беременной женщины.1,8 % (2 ребенка) – неправильное определение резус-фактора детей в роддоме

Таким образом, чувствительность и специфичность применяемого метода диагностики составили 100 %.

Выводы

– новые диагностические наборы для идентификации гена резус-фактора (RHD) «ДНК-резус ребенка» российского производства можно рекомендовать для внедрения в медицинскую практику акушерам-гинекологам для ранней неинвазивной диагностики резус-фактора по крови беременной женщины;- определение резус-фактора на раннем сроке беременности позволяет избежать дорогой медикаментозной профилактики;

– введение антирезус-иммуноглобулина всем резус-отрицательным женщинам, беременным резус-положительным плодом, в дальнейшем приведет к снижению процента резус-сенсибилизированных женщин в России.

Читайте также:
Что такое Лепра – фото болезни, как выглядят первые признаки, методы лечения

Рецензенты:

Шатунова Е.П., д.м.н., доцент, заведующая отделением гинекологии Клиник Сам ГМУ, г. Самара;

Шляпников М.Е., д.м.н., доцент, зам. главного врача по акушерству и гинекологии ММБУ ГКБ№ 2 им. Н.А. Семашко, г. Самара.

Тест на определение пола и резус-фактора ребенка в Москве

Резус-фактором называют белок, который синтезируется на поверхности эритроцитов. Если он отсутствует, то говорят об отрицательном резус-факторе.

Согласно статистике, этот белок не производится у каждого 7 жителя планеты. Если резус-фактор беременной женщины отличается от того, который будет у малыша, возможен резус-конфликт. Такое состояние может негативно отразиться на течении беременности или даже стать причиной ее прерывания. Чтобы этого избежать, будущей маме лучше заранее узнать резус-фактор будущего малыша.

Технология исследования резус-фактора по ДНК матери

Не так давно, чтобы узнать резус-фактор ребенка, нужно было проводить крайне опасную процедуру забора его крови инвазивным методом. Поэтому назначали проведение анализа исключительно в экстренных ситуациях.

Сегодня для процедуры делается забор венозной крови у будущей мамы. Исследование проводится методом ПЦР. В результате удается определить не только резус-фактор, но и группу крови малыша.

Информационный тест ДНК на определение резус-фактора ребенка выполяется в течении:

  • стандартное исследование — от 1 до 5 рабочих дней;

О предположительной дате выдачи результатов лаборатория сообщает в день получения образцов.

Оплатить анализ ДНК можно у представителя лаборатории в Вашем городе, где вы будете сдавать кровь

В каких случаях определяют резус-фактор плода

Если у мамы и будущего ребенка окажутся разные резус-факторы, возможно развитие таких осложнений:

  • гемолитическая болезнь плода;
  • нарушение развития внутренних органов и нервной системы у плода;
  • преждевременные роды или самопроизвольное прерывание беременности.

При этом женщина может чувствовать себя удовлетворительно, даже не подозревая о проблеме. Поэтому уже на раннем сроке, рекомендуется проходить ДНК тест на определение этого белка. Особенно актуальным исследование будет:

  • для женщин, у которых отрицательный резус-фактор;
  • для предупреждения резус-конфликта, если у отца и матери ребенка разные резус-факторы;
  • если женщина отнесена в группу риска относительно резус-изосенсибилизации.

Противопоказания к проведению тестирования

Несмотря на важность этого теста, есть группа женщин, которым исследование не назначают:

  • Если у женщины с положительным резус-фактором отсутствует вероятность резус-конфликта.
  • Одноплодная беременность, начинающаяся, как многоплодная. В таком случае ДНК близнеца, находящееся в кровотоке женщины, может исказить результат.
  • Многоплодная беременность. У плодов может быть разный резус-фактор, поэтому результат нельзя считать информативным.
  • В течение предыдущих 3 месяцев женщине проводилось переливание крови или операции по трансплантации органов, в том числе костного мозга. Результат может оказаться неправильным, из-за циркуляции в этот период в крови ДНК донора.
  • Если у женщины диагностировано онкологическое заболевание.
  • В течение 3 месяцев после проведения аборта, выкидыша, внематочной или замершей беременности.

Преимущества ДНК анализа на определение резус-фактора ребенка

К преимуществам определения резус-фактора относят:

1. Высокую точность полученных результатов (до 99,9 %).

2. Безопасность. Анализ проводится неинвазивным методом, поэтому не представляет никакой опасности для плода. Исследуется венозная кровь женщины.

Читайте также:
У новорожденного мокнет пупок, плохо заживает и гноится: что делать родителям?

3. Возможность ранней диагностики резус-конфликта. Анализ может проводиться, начиная с 10 недели беременности.

Процедура проводится амбулаторно. Если у женщины резус-фактор отрицательный, ей назначают инъекции иммуноглобулина, который способен предотвратить развитие резус-конфликта. Своевременная диагностика и прием препарата позволяет плоду нормально развиваться.

Преимущества лаборатории «Медикал Геномикс»

Преимущества лаборатории «Медикал Геномикс»

Применяем современные методики исследования, базирующиеся на международных стандартах и рекомендациях.

Имеем официальную аккредитацию и лицензию, что позволяет использовать результаты анализов в судебных разбирательствах.

Особенности определения резус-фактора и пола плода по материнской крови методом ПЦР, кому показан и когда его можно проводить?

Марина Дмитриевна

Анализ крови на резус-фактор плода по крови матери, как и другие диагностические мероприятия, сегодня стал частью общепринятой акушерской практики во многих странах. Раньше для выполнения такого анализа генетический образец плода получали с помощью инвазивных методов (амниоцентез).

Инвазивные методы диагностики предназначены беременным женщинам, чьи дети имеют высокий риск получения генетических заболеваний. К ним относятся фетальные хромосомные анеуплоидии и моногенные нарушения с относительно высокой распространенностью в соответствующих популяциях.

Внимание! Стоит отметить, что для хромосомных анеуплоидий, главным образом, синдрома Дауна (СД), расчет риска основан на материнском возрасте, ультрасонографических данных и биохимических маркерах материнской сыворотки.

Что такое анализ на резус-фактор плода?

Неинвазивная методика с использованием материнской периферической крови как источника генетического материала является целью ранней пренатальной диагностики. В противоположность распространенному мнению, что плацента образует непроницаемый барьер между матерью и плодом, есть доказательство двунаправленного движения между плодом и матерью во время беременности.

Многочисленные исследования показывают, что интактные эмбриональные клетки и бесклеточные нуклеиновые кислоты плода (БНК) пересекают плаценту и могут быть найдены в материнском кровообращении. Интактно-эмбриональные клетки представляют собой привлекательную мишень для неинвазивной пренатальной диагностики (НПД) хронических аномалий у зародыша.

Изоляция и анализ клеток плода из материнской крови были широко исследованы, и разработано несколько методов для обогащения плодных клеток. Однако результаты оказались разочаровывающими из-за нехватки интактных клеток в кровообращении у матерей (1 клетка на 1 мл материнской крови) и низкой эффективности методов обогащения. Кроме того, хромосомный анализ методом флуоресцентной гибридизации затруднен из-за аномально плотных апоптотических ядер эмбриональных клеток.

Интактные плодные клетки

В 1997 году ученые сообщили о наличии бесклеточной фетальной ДНК (бфДНК) в материнской плазме и сыворотке в значительных количествах. После этого открытия была создана новая отрасль исследований в пренатальной диагностике.

Как определяют половую принадлежность ребенка по крови мамы?

Определение половой принадлежности основывается на обнаружении специфических Y-хромосомных мишеней в материнской плазме. Положительный результат свидетельствует о беременности ребенком мужского пола, а отрицательный – женского. Такие исследования проводят в специальных лабораториях в условиях инвитро.

Большинство исследований нехирургического определения пола использует ПЦР в режиме realtime для обнаружения SRY и DYS14 последовательностей в материнской плазме. Точность оценки пола плода подтверждена многими исследовательскими группами более чем на 95%, поэтому применение данного диагностического метода было принято в клинической практике.

Важно! Ранняя неинвазивная идентификация может ограничивать количество инвазивных диагностических процедур, необходимых для каждого конкретного заболевания.

Читайте также:
Антибиотик для ингаляций: инструкции по применению

Определение половой принадлежности важно и в тех случаях, когда развитие гениталий неоднозначно, и в семьях с историей состояний, связанных с появлением неоднозначных внешних половых органов и сомнительными результатами эмбрионального УЗИ.

Техника нехирургической идентификации пола была также предложена для терапии некоторых эндокринных расстройств, таких как врожденная гиперплазия надпочечников, при которой маскулинизация женского плода может быть подавлена ​​материнским введением дексаметазона с 6 недели беременности. Такой подход может позволить сократить число пострадавших от этих болезней.

Анализ на определение резус-фактора плода по крови матери

Несоответствие системы резус D (RhD) между беременной женщиной с отрицательным показателем и ее плодом может вести к алоиммунизации матери и гемолитической болезни плода (ГБП). Чаще такое происходит при последующих беременностях, когда плод RhD-позитивный. Регулярная послеродовая инъекция иммуноглобина всем беременным женщинам, страдающим RhD, предотвращает появление ГБП и успешно внедрена в различных государствах.

Гемолитическое заболевание

Определение резус-фактора плода по крови может быть достигнуто путем ПЦР-амплификации последовательностей RhD в амниотической жидкости или образцах хорионической ворсинки. Однако эти инвазивные процедуры несут не только риск выкидыша, но, главное, анализ беременных женщин с негативным риском может привести к иммунизации из-за кровотечения.

Появление НПД с применением бфДНК для определения присутствия резус-фактора у не родившегося плода дает значительный потенциал для изменения способа диагностики беременных женщин. Ген, кодирующих Rh, обычно полностью отсутствует в геноме RhD-отрицательных матерей, обнаружение таких последовательностей в материнской крови подразумевает, что плод должен быть RhD-положительным.

Есть несколько сообщений о высокой степени точности для неинвазивного определения наличия резуса-фактора плода в пренатальном периоде по крови матери, но на сегодняшний день клиническое применение существенно ограничено в развивающихся странах.

Преимущества массового определения Rh-плода путем анализа бфДНК в плазме молодой матери могли бы уменьшить использование иммуноглобулинов. Женщины, несущие Rh-негативный плод (приблизительно 40% из всей популяции), будут избавлены от ненужного воздействия антител с его дискомфортом и риском заражения вирусом (гепатит С) или прионной болезнью.

ПЦР

Технология QF-PCR считается оптимальным методом для надежного обнаружения Rh- последовательностей с использованием бфДНК. Были также предприняты усилия по неинвазивной внутриутробной диагностике состояния RhD плода с помощью масс-спектрометрии. Некоторые ученые использовали автоматизированную систему для извлечения бесклеточной ДНК из плазмы женщины в положении и обнаружили присутствие эктонов RhD.

Анализ на резус-фактор плода по крови матери: где сделать?

Данный анализ на выявление резус-фактора при развитии плода, как упоминалось выше, выполняется по крови матери. Сдавать его необходимо в лабораториях, специализирующихся на ПЦР-диагностике (например, в Хеликсе). Биоматериал берут из вены в локтевом сгибе. Анализ на наличествование резус-фактора по крови матери у плода выполняют с помощью специальной методики – «ПЦР в режиме реального времени». Он сможет быстро определить все генетические последовательности и выявить наличие RhD.

Совет! Сделать анализ можно по назначению лечащего врача или самостоятельно. Нижняя граница срока получения результатов не превышает 14 рабочих дней. Своевременное выявление несовместимости крови может спасти жизнь народившемуся малышу при должном терапевтическом вмешательстве.

Читайте также: Анализ на кариотип – показания к назначению, расшифровка показателей

Читайте также:
Список скрытых инфекций у женщин: симптомы, проведение анализов

Неинвазивное определение пола плода, резус-фактора и хромосомных аномалий (тест NACE)

Иконка календарь

Опубликовано: 27.07.2020 21:11:51

Иконка обновить

Обновлено: 28.09.2021

Иконка глаз

Просмотров: 3590

    / / /
  • Неинвазивное определение пола плода, резус-фактора и хромосомных аномалий (тест NACE)

Обслуживание на двух языках: русский, английский.
Оставьте свой номер телефона, и мы обязательно перезвоним вам.

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначить только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

  • основных хромосомных аномалий, связанных с нарушением числа хромосом X, Y, 13, 18 и 21, в кариотипе плода,
  • пола плода (в случае высокого риска рождения ребенка с наследственным заболеванием, сцепленным с полом),
  • резус-фактора плода для предотвращения резус-конфликта и снижения риска развития гемолитической болезни плода у резус-отрицательных женщин.
  • Расширенная версия неинвазивного теста выявляет анеуплоидии хромосом 9 и 16 – самую частую причину самопроизвольных абортов, а также наиболее значимые хромосомные аномалии, приводящие к развитию известных генетических синдромов.
  • Исследование проводится совместно с компанией Igenomix (Испания) в рамках программы по внедрению инновационных технологий в перинатальной медицине.
  • У 0,5% новорожденных встречаются изменение количества хромосом или значительные хромосомные аберрации
  • 1,2% резус-сенсибилизированных женщин проживает в России, что несёт угрозу резус-конфликта при повторной беременности
  • Более 99% точность неинвазивной пренатальной генетической диагностики

Где и когда берут ДНК плода для анализа?

Внутриутробное развитие плода сопровождается постоянным обновлением его клеток, при этом ДНК из отмирающих клеток эмбриона (фетальная ДНК) поступает в материнский кровоток. ДНК плода можно выделить и исследовать уже на неделе гестации, и практически всегда — после недели. В крови беременной содержится фетальной ДНК, и чем больше срок беременности, тем выше концентрация ДНК плода. Поэтому:

  • для анализа используется кровь беременной женщины;
  • тест NACE рекомендуется проводить не раньше недели беременности;
  • возможно проведение исследования одновременно с первым пренатальным скринингом.

Кому рекомендуется анализ

Показания для неинвазивного определения хромосомных аномалий, пола и резус-фактора плода:

  • возраст родителей (35 лет и старше);
  • высокий риск хромосомной патологии по данным комбинированного скрининга (УЗИ и биохимические сывороточные тесты);
  • рождение ребенка с хромосомной патологией в анамнезе;
  • ситуации, при которых опасно проводить инвазивные процедуры;
  • желание женщины получить более точную информацию о возможных хромосомных аномалиях плода;
  • риск развития резус-конфликта (в случае отрицательного резус-фактора пациентки и положительного резус-фактора мужа, наличии в крови антирезусных антител от первой беременности);
  • клинические случаи, когда для назначения лечения важно знать пол плода (например, возможность проведения гормонального лечения при гиперандрогении надпочечникового генеза у беременной);
  • наличие в семье заболеваний, сцепленных с полом (гемофилия и пр.);
  • беременность после эко.

Цены на услуги

  • Генетика
  • Манипуляции
  • Введение сперматозоида в ооцит, ПИКСИ (дополнительно к ИКСИ) 12 000 руб.

Внимание! Цены на сайте могут отличаться.
Пожалуйста, уточняйте актуальную стоимость у администраторов по телефону.

Наши специалисты:

ЗАПИСАТЬСЯ НА ПРИЁМ ОНЛАЙН-КОНСУЛЬТАЦИЯ

Что позволяет выявить

С помощью неинвазивного метода исследования прежде всего определяют хромосомные нарушения, совместимые с рождением больного ребенка:

  • диагностика основных трисомий: синдром Дауна (трисомия по 21 хромосоме); синдром Эдвардса (трисомия по 18); синдром Патау (трисомия по 13);
  • диагностика численных аномалий половых хромосом: синдром Клайнфельтера (лишняя Х-хромосома у мальчиков, ХХY вместо ХХ); трисомия по Х-хромосоме у девочек (ХХХ вместо ХХ); моносомия по Х-хромосоме у девочек (синдром Шерешевского-Тернера: Х0 вместо ХХ); ХУУ-синдром;
  • диагностика микроделеционных синдромов (микроделеция — утрата маленького участка хромосомы): синдром кошачьего крика; синдром 1р36 делеции; синдром Ди Джорджи; синдром Ангельмана; синдром Прадера-Вилли;
  • определение резус-фактора и пола плода.
Читайте также:
Свечи с метилурацилом при геморрое применение и инструкция

Как проводится исследование

Специальной подготовки к исследованию не требуется, но необходимо соблюдение следующих условий:

  • подтверждение срока беременности по УЗИ
  • сдача крови утром;
  • забор крови непосредственно в лаборатории.

Для исследования требуется венозной крови матери.

Этапы исследования:

  • забор крови и отделение плазмы;
  • выделение фетальной ДНК (используются специальные комплекты наборов);
  • проведение молекулярно-генетического исследования фетальной ДНК (определение числа хромосом);
  • проведение ПЦР для определения резуса плода (при беременности резус-положительным плодом в материнской плазме определяются фрагменты RHD-гена, который отсутствует у резус-отрицательных людей);
  • проведение ПЦР для определения пола плода (выявление У-маркеров — специфических генов, сцепленных с У-хромосомой);
  • интерпретация результатов анализа.

Сроки выполнения анализа составляют

Результаты исследования

При определении «низкого риска» вероятность перечисленных патологий у ребенка очень низкая, но метод не дает 100% гарантии, так как является скрининговым.

При «высоком риске» вероятность хромосомной патологии у плода выше среднего. При таком результате рекомендуется консультация генетика и инвазивная пренатальная диагностика (амниоцентез и биопсия хориона), позволяющая провести более точные генетические исследования.

«Отсутствие результата» возможно по причине низкой концентрации ДНК плода в образце крови. В этом случае следует повторно сдать кровь (повторный анализ проводится бесплатно)

Исследование абсолютно безопасно!

Неинвазивная диагностика основных хромосомных патологий, пола и резус-фактора плода с помощью теста NACE позволяет избежать ненужных инвазивных исследований (амниоцентеза), не столь безопасных во время беременности.

Проведение пренатального неинвазивного теста возможно и при экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО), в том числе при ЭКО с донорскими ооцитами (яйцеклетками), а также в случае суррогатного материнства.

Наши преимущества

  • Специалисты. Опытные специалисты высокой квалификации, с учёными степенями помогают докторам решать сложнейшие репродуктивные проблемы пациентов.
  • Индивидуальный подход, комплексные решения. Индивидуальные эффективные комплексные программы для решения проблем деторождения семейной пары с использованием всех ресурсов нашего ЦМРТ и многопрофильного госпиталя.
  • Генетическая лаборатория. Современная лаборатория молекулярной генетики создана по лучшим мировым стандартам качества — от специального покрытия стен и системы вентиляции, предупреждающей контаминацию (смешение биопрепаратов на молекулярном уровне), до новейшего оборудования и технологий инновационных генетических исследований.
  • Международные связи. Генетическая лаборатория нашего госпиталя активно сотрудничает с лабораторией Лондонского университета, генетическими лабораториями BGI Europe и Ingenomix (Испания), международной сетью клиник IVIIVF.

Статья проверена молекулярным биологом, лабораторным генетиком, к.б.н. Кибановым М.В., носит общий информационный характер, не заменяет консультацию специалиста.
Для рекомендаций по диагностике и лечению необходима консультация врача.

Обслуживание на двух языках: русский, английский.
Оставьте свой номер телефона, и мы обязательно перезвоним вам.

Читайте также:
Что такое Лепра – фото болезни, как выглядят первые признаки, методы лечения

Как узнать резус фактор плода

Под понятием «резус фактор» подразумевают белок, который покрывает поверхность эритроцитов. Если он отсутствует, значит, данный показатель является отрицательным. Этот параметр обязательно учитывается при беременности, поскольку его разное значение у женщины и плода может спровоцировать резус-конфликт. Поэтому вопрос о том, как определить резус фактор у ребенка до рождения с высокой точностью, является жизненно важным.

Для чего это необходимо? Возникновение такого конфликта чревато самыми неприятными последствиями. Это может вызвать гемолитическую болезнь, быть гибель плода или рождение ребенка с различными патологиями. Формирование резуса у плода происходит на восьмой неделе беременности, именно в этот период и может возникнуть опасная ситуация.

как узнать резус фактор ребенка

Поэтому, во время беременности обязательно проводится анализ на определения резус-фактора. Это поможет в дальнейшем контролировать ситуацию, по количеству выявленных антител следить за возможным развитием конфликта и своевременно назначить терапию. Точная диагностика и своевременно принятые меры позволят благополучно выносить и родить абсолютно здорового ребенка.

Как определить резус фактор крови у ребенка

До недавнего времени анализ проводился с применением инвазивных методик. Чтобы узнать резус фактор крови у плода, проводили процедуру кордоцентеза или исследовали амниотическую жидкость. Для этого производили забор материала из пуповины или околоплодных вод путем проникновения в полости. Такие манипуляции сопряжены с определенным риском, вероятность прерывания беременности достигает до 3%.

Поэтому инвазивные исследования назначали только при достижении определенного уровня антител. Несмотря на всю сложность, данная методика не обеспечивала необходимой точности результата.

как определить резус фактор плода

На сегодняшний день существует безопасная и надежная альтернатива инвазивным методам исследования — это неинвазивный пренатальный ДНК тест. Она позволяет безо всяких рисков для плода и будущей мамы провести необходимые анализы и получить точный результат.

Как узнать резус фактор ребенка

Современные технологии позволяют проводить высокоточные молекулярно-генетические исследования без вмешательства в полость матки. Как узнать резус фактор крови ребенка самым безопасным и точным способом? На первых сроках беременности в крови женщины уже присутствуют фетальные ДНК, доля которых может составлять до 5% от общего количества.

Путем лабораторного анализа молекул ДНК плода устанавливается наличие или отсутствие гена RhD. Если он обнаруживается, значит, показатель малыша – положительный. Такое исследование получило название «ПЦР» — полимеразная цепная реакция. Материал для его проведения – венозная кровь будущей мамы.

как определить резус фактор у ребенка

Начиная с восьмой недели беременности, когда необходимые признаки сформировались на клеточном уровне, проведение ПЦР позволит абсолютно точно установить пол, наличие гена RhD и возможные наследственные заболевания.

Как определить резус фактор крови у ребенка в лаборатории ДТЛ

Молекулярно-генетический Центр «ДТЛ» специализируется на проведении современных исследований, основанных на последних научных достижениях. Наличие специального оборудования, штата высококлассных опытных специалистов позволяет проводить самые точные и результативные анализы.

Мы имеем большой опыт по проведению безопасных неинвазивных исследований для определения различных состояний плода. Все, что требуется от будущей мамы – сдать анализ крови. Сделать это можно непосредственно в нашем Центре или его представительствах в других городах. Для получения детальной информации и бесплатной консультации – предлагаем заказать обратный звонок.

Ссылка на основную публикацию