Фрагментация ДНК сперматозоидов в спермограмме: цель анализа, лечение патологии

Что такое фрагментация ДНК в сперматозоидах

Одной из причин мужского бесплодия является нарушение целостности цепочек ДНК, в которых заложена генетическая информация о будущем ребенке. В эякуляте каждого мужчины содержится определенный процент сперматозоидов с поврежденной ДНК. Если уровень фрагментации ДНК сперматозоидов находится в норме (не превышает порогового значения в 15%), вероятность зачатия высока, и пара радуется наступившей беременности, даже не подозревая о возможных проблемах. Но вдруг что-то идет не так, и беременность прерывается. Если это происходит раз за разом, обоим партнерам необходимо пройти обследование.

Нарушение целостности структуры нуклеиновых цепочек приводит к образованию обрывков молекулы ДНК, что и называется фрагментацией. Чем выше содержание сперматозоидов с фрагментацией ДНК, тем меньше шансов на естественное зачатие. В случае если оно все же произошло, велика вероятность развития у ребенка онкологических заболеваний и генетических нарушений.

Причины фрагментации

Разрывы цепочек ДНК могут возникнуть под воздействием внешних и внутренних факторов.

Внутренние факторы, приводящие к нарушению целостности цепочек ДНК, можно условно разделить на две большие группы: сбой в механизме отбраковки и нарушение созревания сперматозоидов.

Формирование сперматозоидов с нарушениями ДНК вовсе не повод для беспокойства. В большинстве случаев дефектные клетки отбраковываются и удаляются из организма. Но если этот механизм дает сбой, концентрация дефектных клеток возрастает, что неизбежно ведет к проблемам с зачатием.

Другой причиной высокого содержания сперматозоидов с фрагментацией ДНК может быть неадекватное вызревание, приводящее к конденсации хроматина клеточного ядра и снижению содержания протаминов, обеспечивающих стабильность молекулы ДНК.

К внешним факторам относятся:

  • рентгеновское облучение и химиотерапия;
  • варикоцеле;
  • воздействие высоких температур;
  • некоторые хронические заболевания, а также инфекционно-воспалительные процессы;
  • оксидативный стресс;
  • злоупотребление алкоголем и табаком;
  • неблагоприятная экологическая обстановка;
  • психоэмоциональные нарушения, стресс.

Типы тестов и подготовка к исследованию

Для оценки фрагментации ДНК разработано несколько видов тестов. Наиболее популярные из них следующие:

  • TUNEL-тест. Для выявления повреждений нуклеиновых цепочек используется оптический эффект. Образец спермы смешивается с энзимом, маркированные нуклеотиды которого встраиваются в поврежденные сегменты цепочек. Поврежденные сперматозоиды приобретают окраску (при исследовании по методу светлого поля) или подсвечиваются (при флуоресцентном методе), после чего их можно подсчитать и вычислить индекс фрагментации – процент поврежденных клеток по отношению к общему количеству. Референсное значение для tunel-теста составляет 15%;
  • HALOSPERM-тест (метод SCD). Основное отличие от предыдущего метода состоит в подсчете клеток не имеющих повреждений. Тест отличается высокой чувствительностью;
  • SCSA-тест. Клетки подсвечиваются лазерным лучом и в зависимости от степени повреждений приобретают характерную окраску: зеленый — повреждений нет, желтый — незначительные нарушения, красный — серьезные дефекты. Референсное значение составляет 20%.

Забор материала для исследования производится так же, как и для обычной спермограммы, методом мастурбации. Чтобы результаты были максимально точными, рекомендуется сдавать сперму в клинических условиях в стерильную посуду.

При подготовке к тесту нужно соблюсти несколько условий:

  • соблюдать воздержание 3–5 дней;
  • отказаться от приема алкоголя и сильнодействующих веществ;
  • не рекомендуется посещать баню или сауну, а также проводить долгое время на пляже. При следовании в лабораторию в автомобиле не следует пользоваться функцией подогрева сиденья;
  • желательно избегать стрессовых ситуаций;
  • не следует проводить исследование, если в течение предшествующих двух недель приходилось принимать антибиотики;
  • после перенесенного заболевания, сопровождающегося повышением температуры, желательно выждать не менее двух недель.

Расшифровка результатов

Результат исследования оформляется в табличной форме, где приведен полученный результат в процентах и указано референсное значение для данного вида теста.

Читайте также:
Молоко с прополисом на ночь. Польза, рецепт от кашля, при панкреатите, для поджелудочной железы, желудка, иммунитета

Для TUNEL-теста расшифровка выглядит следующим образом:

  • низкая степень фрагментации ДНК сперматозоидов (15–30%) — зачатие возможно, хотя и затруднено;
  • фрагментация ДНК сперматозоидов повышена незначительно и составляет 30–50% — естественное зачатие маловероятно, но хорошие результаты прогнозируются для ЭКО;
  • 50–60% — возможно только искусственное зачатие с невысокой степенью вероятности;
  • более 60% — зачатие при помощи собственного семенного материала маловероятно.

Ниже приведена интерпретация результатов HALO-теста:

  • степень фрагментации ДНК сперматозоидов менее 20% — вероятность естественного зачатия высокая;
  • 20–30% — вероятность зачатия стабильна, но есть риск замирания беременности и выкидыша;
  • 30–50% — естественное зачатие маловероятно, рекомендуется прибегнуть к процедуре ЭКО;
  • 50–60% — рекомендуется процедура ИКСИ;
  • повышенное содержание сперматозоидов с фрагментацией ДНК более 60% — рекомендуется воспользоваться донорской спермой.

Лечение фрагментации ДНК сперматозоидов

Фрагментация ДНК может не являться симптомом заболевания. В данном случае корректно говорить о патологическом состоянии. Если патология вызвана какими-либо внешними причинами, целесообразно устранить их насколько это возможно в конкретном случае. Зачастую улучшить параметры эякулята можно, например, при смене рода деятельности, изменении условий жизни, отказе от внешних привычек, излечении от инфекционного заболевания и т. д.

Если у пациента диагностирована фрагментация ДНК сперматозоидов высокой степени, назначается лечение при помощи антиоксидантной терапии. Для снижения концентрации сперматозоидов с поврежденной ДНК рекомендуется частый секс.

Многие пары сталкиваются с проблемой отсутствия зачатия или невынашивания беременности. До недавних пор бытовало мнение, что вся ответственность за это лежит на женщине. Некоторые полагают, что раз оплодотворение произошло, вся дальнейшая ответственность лежит на женщине. Это не совсем так. Сегодня медицина пришла к выводу, что в основе почти половины случаев бесплодия лежит так называемый “мужской фактор”.

Чтобы обезопасить будущего ребенка и с радостью провести время в ожидании его появления на свет рекомендуем еще на этапе планирования беременности пройти обследование обоим партнерам.

Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов и как с ней бороться

Хорошие результаты спермограммы еще не означают, что мужчина гарантированно может иметь детей. Около десяти лет назад ученые открыли еще одну причину мужского бесплодия – повышенную долю сперматозоидов с фрагментированной ДНК. Эту причину невозможно узнать по обычному анализу спермы (спермограмме), но существуют и методы диагностики, и клинически доказанные способы терапии.

Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов и как с ней бороться

Фрагментация ДНК и ее причины

Фрагментация ДНК – это разрыв одной или двух ее цепочек. Сперматозоиды с фрагментированной ДНК не способны оплодотворить яйцеклетку, либо оплодотворение происходит, но практически сразу беременность прерывается. Это относится в том числе к ЭКО и интрацитоплазматической инъекции.

Повреждение генетического материала происходит в процессе образования, созревания и существования сперматозоидов. Во всем виноваты свободные радикалы и апоптоз (механизм программируемой смерти клеток).

Свободные радикалы наносят урон ДНК, когда в сперме содержится недостаточно антиоксидантов (веществ, которые уничтожают избыточное количество свободных радикалов). Такое состояние называется окислительным стрессом.

Что касается апоптоза – то это естественный процесс, сперматозоиды имеют определенный срок жизни и гибнут по его истечении. Начинается апоптоз с разрушения ДНК. Поэтому небольшое количество сперматозоидов с фрагментированной ДНК всегда есть в сперме.

Диагностика и лечение

Стандартный анализ спермограммы о фрагментации ДНК ничего не скажет, нужно и отдельное исследование. Показания к нему – самопроизвольные прерывания беременности на ранних стадиях у партнерши и идиопатическое бесплодие мужчины, когда без видимых причин мужчине не удается стать отцом.

Читайте также:
Сухость глаз — что делать если слезятся глаза на улице, зимой, при простуде

Как уже упоминалось, фрагментированные ДНК есть в сперме всех мужчин, разница в количестве. Когда доля сперматозоидов с нарушениями ДНК составляет около 15%, это считается нормой и на фертильность не влияет. А вот 20–30 % – уже говорят о бесплодии. Чем выше процент, тем меньше шансов на зачатие.

Современный способ снижения количества фрагментированных ДНК – коррекция окислительного стресса. Для этого назначают витамины-антиоксиданты и другие вещества с антиоксидантной активностью. Один из таких препаратов – Синергин. Его эффективность доказана клиническим исследованием в 2016 году.

Как проходило исследование?

В исследовании эффективности Синергина участвовали 27 супружеских пар. У всех мужчин были нормальные показатели спермограммы. У женщин – отсутствие беременности, неоднократные выкидыши или несколько неудачных попыток применения вспомогательных репродуктивных технологий.

Во время исследования мужчины принимали комплекс Синергин. Он содержит шесть мощных природных антиоксидантов в высокой дозировке: коэнзим Q10, витамин Е, витамин С, рутин, ликопин и бета-каротин. Курс приема составил 3 месяца, это связано с тем, что сперматозоиды созревают 72 дня. Любой курс, направленный на улучшение состояния мужской фертильности, обычно имеет такую продолжительность.

Эффективность Синергина подтверждена!

Давайте посмотрим на результаты.

Доля сперматозоидов с фрагментированной ДНК:

  • исходное значение – 23 %;
  • через 1 месяц приема Синергина – 17,2 %;
  • через 3 месяца приема Синергина – 14,8 %.

То есть к концу приема препарата показатель соответствовал уровню здорового фертильного мужчины.

Содержание антиоксидантов в сперме характеризует антиокислительная активность спермы. Чем выше этот показатель, тем больше антиоксидантов и тем меньше свободных радикалов в сперме.

Антиокислительная активность спермы:

  • исходное значение – 1,21 нМ/мл;
  • через 1 месяц приема Синергина – 2,11 нМ/мл;
  • через 3 месяца приема Синергина – 2,54 нМ/мл.

Как видим, к окончанию курса приема Синергина содержание антиоксидантов в сперме увеличилось в 2 раза!

Результаты исследования не ограничились нормализацией показателей. За время наблюдения забеременели 3 семейные пары, и все три беременности завершились родами в срок.

Исследование доказало, что прием комплекса Синергин в течение 3 месяцев снижает долю сперматозоидов с фрагментацией ДНК до нормальных значений, а также способствует коррекции окислительного стресса эякулята. Заметный эффект наблюдается уже через 1 месяц приема, полный – через 90 дней.

Современная медицина дает все больше шансов супружеским парам забыть про диагноз «бесплодие». Достижения последних лет позволяют справиться с казалось бы безнадежными случаями приемом специализированных комплексов антиоксидантов. Никто не может дать гарантий, но увеличить шансы на долгожданную беременность современным врачам вполне по силам.

Фрагментация ДНК сперматозоидов (TUNEL-тест)

Что такое фрагментация ДНК

Под фрагментацией ДНК сперматозоидов следует понимать нарушение целостности их цепочек. Чем сильнее повреждения, тем хуже качество генетического материала, следовательно, низкая вероятность наступления оплодотворения.

Если повреждения несущественны, яйцеклетка в состоянии устранить их самостоятельно. Это зависит от характера фрагментации, количества поврежденных участков, качества самой яйцеклетки (обычно ее определяет возраст и состояние репродуктивного здоровья женщины).

Причины

Причины нарушения ДНК бывают двух типов: внешние и внутренние. Внутренние это:

  • Сбой механизма отбраковки. У здоровых мужчин непригодные к оплодотворению сперматозоиды, вырабатываемые семенниками (тестикулами), устраняются. Но если функционирование механизма нарушено, они попадают в сперму, снижая ее качество и способность к зачатию.
  • Нарушение процесса вызревания. Созревают сперматозоиды в придатках яичек, в ходе вызревания происходит конденсация хроматина ядра клеток, отвечающая за активность сперматозоидов. Если процесс протекает с отклонениями, это становится причиной фрагментации их ДНК.
  • Прохождение лечения химио- и рентгенотерапией.
  • Повышенная температура тела.
  • Варикоз сосудов семенного канатика.
  • Высокотемпературные воздействия.
  • Наличие хронических заболеваний, воспалений, инфекций.
  • Оксидативный стресс при переходе через эпидидимий. Повреждения вызывают свободные радикалы, либо сперматозоиды выходят невызревшими.
Читайте также:
Хохлатка расставленная описание, противопоказания, рецепты

Также нарушение цепочки ДНК вызывают токсины, прием антибиотиков, заболевания мочеполовой системы, вредные привычки.

Показания к анализу

Чтобы выявить разрыв ДНК-цепочки сперматозоидов, проводится специальный тест. Спермограмма в данном случае неинформативна. Она показывает только концентрацию сперматозоидов в эякуляте, их активность. Тест на фрагментацию показан:

  • при мужском бесплодии, если отсутствуют другие провоцирующие его факторы;
  • если попытки искусственного оплодотворения не дали результата;
  • повторяющиеся выкидыши;
  • если эмбрион плохого качества;
  • мужчинам в возрасте от 45 лет;
  • после криохранения образца спермы перед ЭКО (экстракорпоральным оплодотворением);
  • при варикозе сосудов семенного канатика;
  • если в течение трех месяцев имела место повышенная температура тела.

Также процедуру должны пройти мужчины, работающие в условиях повышенной вредности.

Как проводится анализ

TUNEL-тест

Для проверки целостности ДНК спермы проводится tunel-тест, предполагающий микроскопическое исследование сперматозоидов. Образец спермы пациент должен собрать в специальный стерильный контейнер с крышкой. Важно! Презерватив не подходит для этой цели, так как компоненты, входящие в его состав, могут оказать негативное влияние на подвижность сперматозоидов. Также при транспортировке емкости с генетическим материалом необходимо соблюдать температурный режим, составляющий диапазон температур в пределах +27 до +37 градусов Цельсия.

Чтобы получить точный результат, анализ должен быть проведен в течение часа с момента забора образца. Для этого лаборант добавляет в эякулят реактив. Он, вступая в реакцию с семенной жидкостью, заполняет разрывы ДНК флуоресцирующим нуклеотидом, делая видимыми фрагментированные сперматозоиды. Лаборант проводит их подсчет, который указывается в процентах.

Для получения полной картины параллельно проводится электронно-микроскопическое исследование и спермограмма.

Подготовка к TUNEL-тесту

Чтобы тест был максимально точным, перед сдачей образца необходимо в течение 2-7 дней: воздержаться от половых контактов, приема лекарственных препаратов, посещения бань. Важно соблюдать режим питания, избегать употребления алкоголя, не курить. Перед забором спермы нужно освободить мочевик.

При повторных проведениях анализа рекомендуется соблюдать последовательность и длительность подготовительных мероприятий, так как это может повлиять на результат.

Расшифровка

После анализа выдается результат с индексом теста и снимок, на котором зафиксированы фрагментированные сперматозоиды. Индекс – это соотношение между поврежденным и здоровым, способным к оплодотворению, генетическим материалом. В норме показатель не должен быть выше 15%. Это говорит о том, что спермиев с разрушенной цепочкой ДНК меньше, чем здоровых, поэтому репродуктивное здоровье мужчины в порядке и существует высокая вероятность естественного зачатия.

При индексе выше 15%, но ниже 30% сохраняется возможность оплодотворения яйцеклетки естественным способом, но для этого может потребоваться много времени.

Если количество поврежденных сперматозоидов в эякуляте составляет 30-50%, специалисты считают, что наступление беременности естественным путем маловероятно, поэтому рекомендуют ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение), внутриматочную инсеминацию (репродуктивная методика, предполагающая введение здоровых, полученных и отобранных заранее сперматозоидов в цервикальный канал) или ИКСИ. Так, при показателе индекса более 30%, врачи-репродуктологи рекомендуют проводить ЭКО. Если фрагментированный генетический материал составляет 50% и выше, экстракорпоральное оплодотворение малоэффективно. Целесообразно применять интрацитоплазматическую инъекцию сперматозоидов (ИКСИ). При индексе 60% и больше, шансы на успешное оплодотворение минимальны. Проводится ИКСИ, либо берется донорская сперма.

Лечение

Еще недавно отсутствовала возможность выявить поврежденные сперматозоиды, не говоря о том, чтобы это лечить. Сегодня эта проблема поддается лечению. Внедрение инновационных медицинских методик позволяет успешно восстанавливать фрагментированную ДНК сперматозоидов.

Для этого следует устранить или ограничить воздействие факторов, провоцирующих мужское бесплодие: лишний вес, вредные привычки (курение, алкоголь), воздействие токсических, химических веществ (работа на вредных производствах). Второй этап – комплексная диагностика, устранение различных воспалительных процессов в организме, в том числе заболеваний репродуктивной системы мужчины. Параллельно проводится лечение антибактериальными, противовоспалительными медпрепаратами (при необходимости). Обязательно назначаются витаминные комплексы, антиоксиданты, позволяющие восстановить мужское здоровье и способствующие формированию здоровых сперматозоидов.

Читайте также:
Характеристика 4 отрицательной группы крови у женщин

Длительность лечения может составлять 3-6 месяцев. Иногда может понадобиться больше. Если терапия оказалась малоэффективной, и количество здоровых сперматозоидов не превышает 20-30%, врачи предлагают паре услугу ИКСИ. Так, из эякулята репродуктологи искусственным путем отбирают здоровый, способный к оплодотворению, генетический материал. Затем его подсаживают в яйцеклетку женщины.

В случае большого количества спермиев с фрагментированным ДНК, также проводиться операция по извлечению их непосредственно из яичек. Это обусловлено тем фактом, что во время эякуляции повышается процент поврежденных клеток.

Ответы на популярные вопросы

Влияет ли прием лекарств на анализ на фрагментацию ДНК?
На фрагментацию ДНК влияет прием некоторых лекарственных средств и химиопрепаратов.

Как улучшить фрагментацию ДНК?
Сначала необходимо разобраться в возможных причинах фрагментации и затем убрать ее причину, если это возможно.

Фрагментация ДНК сперматозоидов – сдать анализ

Фрагментация ДНК сперматозоидов: что это и как ее измерять

В лаборатории СПЕРМА-ТЕСТ определение индекса фрагментации ДНК проводится методом HALO.

Что такое тест для оценки фрагментации ДНК?

HALO-тест это актуальный метод оценки целостности ДНК. Поэтому сначала мы рассмотрим его.
В отличие от других методов, HALO выявляет и “подсвечивает” не поврежденную, а целую ДНК. Вокруг “здоровых” сперматозоидов с неповрежденной ДНК формируется ореол, который отчетливо виден на оптическом микроскопе. Таких ореолов нет у мужчин с поврежденной ДНК.

Анализ выполняют спустя 30-60 минут после разжижения эякулята. Оценивают от 200 до 500 сперматозоидов с хвостами (незрелые не оценивают).

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов: фото с микроскопа

ВОЗ

Здоровые сперматозоиды подсвечиваются большим и четким ореолом

У сперматозоидов с неповрежденной ДНК-молекулой есть четкий большой ореол. У сперматозоидов с фрагментацией (разрывами) ДНК такого ореола нет или он не четкий.

В основе теста HALO лежит метод SCD (запатентован компанией Halotech) . На сегодняшний момент этот метод активно используется в клинической практике и участвует во множестве клинических испытаний. HALO считается более чувствительным тестом, по сравнению с остальными.

Референсное значение (норма) для этого теста – 20% и ниже.

Это значит, что сперматозоидов с фрагментацией ДНК должно быть меньше 20% от общего количества.

Как проводится анализ фрагментации ДНК (HALO-тест)?

Лаборант смешивает сперму со специальным реактивом, запуская тем самым процесс денатурации ДНК, а затем окрашивания. Если ДНК спермы не повреждена (не фрагментирована), вокруг плотного центрального ядра ДНК образуется четкий «ореол». Если ДНК спермы имеет разрывы, то ореола нет, даже если он проявляется, то очень тонкий и неясный. Это хорошо видно под микроскопом, когда сперматолог-эмбриолог считает сперматозоиды с фрагментированной ДНК. Результат подсчета выражается в процентах, и в норме он не должен быть более 20%.

Для полноты обследования параллельно с анализом фрагментации ДНК обычно выполняют спермограмму и ЭМИС (электронно-микроскопическое исследование спермы). Если они были сделаны ранее, но не более 3 месяцев назад, покажите их врачу на консультации. Все 3 анализа можно провести из одной порции спермы.

Как сдавать сперму и готовиться к анализу?

Подготовка подразумевает воздержание в течение 2–5 дней.

Читайте также:
Пролапс митрального клапана 1 степени: можно ли заниматься спортом, допустимые нагрузки

Метод сбора эякулята – мастурбация.

Ёмкость для сбора эякулята – стерильный контейнер (бесплатно у администратора лаборатории)

Непосредственно перед сбором материала нужно освободить от содержимого мочевой пузырь и помыть половые органы

Если тест проводится неоднократно, продолжительность воздержания должна быть всегда одинаковой. Это важно для сравнения результатов в динамике.

Если образец собирается дома, то доставить контейнер в лабораторию должен курьер в контейнере, поддерживающим температуру.

Результат теста на фрагментацию и его расшифровка

У каждого теста свои нормы (референсные значения). После проведения исследования формируется протокол, где указан индекс фрагментации ДНК.

Ниже описаны варианты результатов и рекомендации по тактике лечения. Эти рекомендации основаны на исследованиях, проводимых реальными научными группами за последние 10 лет. Это ценный исследовательский опыт, но это все равно только рекомендации. Интерпретировать результаты должен ваш лечащий врач и исходя из истории болезни предлагать варианты лечения.

Что показывает индекс фрагментации? Он отражает процентное соотношение между «здоровыми» сперматозоидами и сперматозоидами с разрывами в ДНК-цепочках.

Рассмотрим расшифровку на примере норм для HALO-теста.

Результат анализа считается нормальным, если индекс фрагментации не превышает 20%. Это означает, что количество половых клеток с поврежденной ДНК составляет не более 20% от общей их численности. Существует высокая вероятность наступления здоровой беременности естественным путем.

Если индекс фрагментации повышен и находится в пределах от 20% до 30%, естественное оплодотворение возможно, но не исключено, что для этого потребуется больше времени. Увеличен риск выкидыша из-за задержки или остановки развития плода.

Наступление беременности естественным путем маловероятно, если уровень фрагментации выше 30%, но ниже 50%. Рекомендовано использование технологии ЭКО.

Если результат выше 50% рекомендуется воспользоваться ИКСИ-технологией. При таких результатах ИКСИ будет эффективнее ЭКО.

Если результат выше 60% шансы на беременность даже с применением вспомогательных репродуктивных технологий крайне низкие. Лучше использовать сперму донора.

Важно

Если индекс фрагментации ДНК сперматозоидов равен 50% и более, даже при использовании репродуктивных технологий наступление беременности маловероятно.

Получили результат на руки? Покажите андрологу.

Популярные вопросы об индексе Фрагментации

Получил результат. Индекс фрагментации 21%. Что это значит?

Это случай пограничного результата. Нет повода для паники. Этот результат самый близкий к норме. Покажите заключение андрологу. Врач может назначить лечение антиоксидантами и рекомендовать оптимизировать образ жизни (режим работы и отдыха, снижение уровня стресса, прогулки на свежем воздухе и спортивная активность).

Фрагментация ДНК сперматозоида и мужское бесплодие

Одна из причин мужского бесплодия – это повреждение (фрагментация) цепочки ДНК, находящейся в ядре головки сперматозоида. Именно в молекуле этой нуклеиновой кислоты закодирована и хранится вся генетическая информация, которая при зачатии передается ребенку. И чем больше в молекуле ДНК таких разрывов, тем меньше вероятность оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом.

Фрагментация ДНК: что покажет спермограмма?

Спермограмма – золотой стандарт первичной оценки качества спермы. Нормы спермограммы не пересматривались с 2010 года. С введением оценки морфологии по Крюгеру, этот анализ достиг максимальной диагностической значимости. Однако до сих пор спермограмма не может объяснить даже половины случаев мужского бесплодия. Поэтому репродуктологам пришлось искать другие, более глубокие и конкретные методы исследования.

Диагностировать разрывы ДНК при проведении спермограммы невозможно. Сперматозоиды с поврежденной ДНК обычно сохраняют хорошую подвижность. Иногда они даже способны к оплодотворению, но наступившая беременность замирает или прерывается уже на ранних сроках.

За последние 10 лет наука убедилась, что повреждения ДНК сперматозоидов напрямую связаны с нарушениями оплодотворения, задержками развития эмбриона, плохой имплантацией, выкидышами. Т.е. со всеми сложностями наступления и начала протекания беременности.

Читайте также:
Тромб: причины образования в сосудах человека и симптомы патологии, отрывание сгустка и способы избежать

К категории бесплодных относят не только пары с проблемами зачатия, но и с проблемами вынашивания (замершая беременность, повторяющиеся выкидыши). Вот в таких парах, при условии, что женщина здорова, мужчине ставят диагноз идиопатическое бесплодие, если не обнаруживают никаких выраженных патоспермий по результатам спермограммы. Идиопатическое – значит, что причина неизвестна.

У меня хорошая спермограмма. Не выявлено никакой патоспермии. Зачем мне сдавать анализ на фрагментацию сперматозоида?
Исследования 2016 года показали, что 10% мужчин с нормальными показателями спермограммы имели высокий индекс фрагментации ДНК сперматозоидов и входили в категорию пациентов с идиопатическим бесплодием (т.е. бесплодие по неизвестным причинам). Поэтому есть вероятность, что у вас аналогичный случай. И тогда ваши сперматозоиды с нормальной подвижностью и морфологией будут усиливать шансы на успешную беременность.

Avatar

Меньщиков Константин Анатольевич
Андролог, уролог
Куратор лаборатории сперматологии

Для тех, у кого плохие результаты спермограммы или повышен индекс фрагментации ДНК сперматозоидов. Эффективные схемы лечения даже самых сложных случаев. Медикаментозная стимуляция и коррекция сперматогенеза. Успех – 87% случаев.

Кому назначают Исследование фрагментации ДНК?

повреждения в цепочке молекулы ДНК в сперматозоиде

Показания для назначения тестов на ДНК-фрагментацию:

  • идиопатическое (необъяснимое) мужское бесплодие
  • замершая беременность (задержка развития эмбриона)
  • многократное и безуспешное ЭКОИКСИ
  • повторяющиеся выкидыши
  • варикоцеле
  • возраст мужчины 45 лет и более

Кроме того, тест на фрагментацию ДНК проводится перед замораживанием донорской спермы для оценки ее качества и во время подготовки к проведению ЭКО (экстракорпорального оплодотворения) или ИКСИ (интрацитоплазматического введения сперматозоидов).

Анализ фрагментации ДНК и ВРТ (ЭКО, ИКСИ)

Анализ фрагментаций ДНК помогает определить какой именно из методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) поможет конкретной паре. Так, парам, с низким и средним количеством повреждений ДНК у мужчины помогут внутриматочная инсеминация (IUI) и экстрокорпоральное оплодотворение. А парам с высоким уровнем повреждения ДНК поможет ИКСИ (ICSI).

Единственная группа пар, для которых анализ повреждений ДНК не принесет пользы это те,в которых у мужчины диагностирована и подтверждена олигоастенотератозооспермия (т.е. 3 патоспермии сразу). Таким парам может помочь только ИКСИ и опытный андролог может сразу это сказать.

Анализ на фрагментацию ДНК необходим парам с идиопатическим мужским бесплодием. Т.е. когда диагностика устанавливает, что причина в мужчине, однако не может объяснить причину, поставить диагноз и назначить лечение. Для пары с идиопатическим мужским бесплодием, фрагментация ДНК поможет сохранить время, не тратя его на неудачные попытки ЭКО, безрезультатные схемы лечения и общего укрепления организм. Не тратьте время на пустое волнение, отчаяние и пустое ожидание.

Почему происходит фрагментация ДНК сперматозоидов?

Одним из наиболее изученных механизмов повреждений цепочек ДНК является действие свободных радикалов (активных форм кислорода). Они окисляют молекулу ДНК, нанося ей тем самым ущерб.

Чтобы внести ясность: свободные радикалы и повреждения ДНК есть у всех мужчин. Но в норме таких повреждений не много, а свободным радикалам должны противостоять антиоксиданты.
Антиоксиданты защищают сперматозоиды, поглощая свободные радикалы. Ими богата семенная плазма – жидкость, в которой “плавают” сперматозоиды.

Чтобы выяснить как много таких потенциально опасных свободных радикалов в сперме мужчины, выполняют Исследование активных форм кислорода в нативном эякуляте (ROS) (т.е. так как он есть) или Исследование активных форм кислорода в отмытых сперматозоидах (ROS), отмывая сперматозоиды от семенной плазмы. Какой именно тест следует провести – может подсказать врач.

Читайте также:
Расстройства вегетативной нервной системы: виды дисфункций

Чтобы выяснить насколько хорошо антиоксиданты противостоят свободным радикалам, выполняют анализ на антиокислительную активность семенной плазмы.

Что влияет на повышение фрагментаций ДНК?

Повреждения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты могут произойти как во время созревания мужской половой клетки, так и в зрелом ее состоянии. На появление разрывов цепочки ДНК влияют:

1. Внешние факторы:
  • радиация и токсические химические вещества;
  • перенесенные инфекции, в том числе передающиеся половым путем;
  • неблагоприятные климатические и экологические условия в районе проживания;
  • стресс и нездоровое питание;
  • курение, злоупотребление алкоголем;
  • варикоцеле;
  • возраст мужчины старше 40–45 лет;
  • хронические заболевания органов мочеполового тракта;
  • химиотерапия;
  • генетическая предрасположенность.
2. Внутренние факторы:
  • неполное созревание мужских половых клеток;
  • в норме мужской организм сам отбраковывает большую часть некачественных сперматозоидов, и в эякулят попадают лишь единицы из них. Если по какой-то причине в работе системы по отбраковке происходит сбой, в сперме оказывается гораздо больше «больных» половых клеток. От этого качество эякуляции не страдает, но снижается вероятность успешного оплодотворения.

Существуют данные исследований, подтверждающие, что женская яйцеклетка, оплодотворенная сперматозоидом с фрагментированной ДНК, способна «вылечить» его, восстановить поврежденную генетическую структуру. Но успех такого «лечения» определяется, в первую очередь, биологическим возрастом и состоянием здоровья женщины. Только молодые яйцеклетки, имеющие высокий потенциал к восстановлению ДНК сперматозоида, способны устранить подобный дефект. Кроме того, большое значение имеют степень разрушения и характер повреждений генетических структур.

Анализы фрагментации ДНК сперматозоидов: HALO или TUNEL?

Главное различие между этими анализами заключается в том, что HALO подсвечивает сперматозоиды с “целой” ДНК, а TUNEL – с поврежденной. Есть так же отличие в чувствительности тестов в пользу HALO и времени выполнения. На анализ фрагментации ДНК методом HALO требуется в 5-7 раз меньше времени.
Индекс фрагментации в отличие от спермограммы показывает нарушения целостности цепочек ДНК. Поврежденная ДНК часто может быть у мужчин с хорошими результатами спермограммы. Потому что сама молекула ДНК никак не влияет на основные параметры, тестируемые при анализе спермограмма: морфология, подвижность, количество сперматозоидов.

Почему анализы разные?

Как только была обнаружена значимая взаимосвязь фрагментации ДНК с проблемами на ранних сроках беременности, начались поиски универсального анализа. Новые методы анализа и исследований фрагментации ДНК появляются каждый год. Все они должны пройти клинические исследования, доказать свою диагностическую значимость. В лаборатории СПЕРМА-ТЕСТ определение Индекса Фрагментации ДНК проводится методом HALO (HALOSPERM) . Мы, как эксперты в области сперматологии рекомендуем использовать именно технологию HALO.

Что такое TUNEL-тест?

Tunel-тест – это микроскопическое исследование спермы, цель которого – обнаружить сперматозоиды с поврежденной ДНК и посчитать их количество.

Метод позволяет оценить масштаб повреждений ДНК в сперматозоидах. Сперма смешивается со специальным реактивом. Запускается ферментативная реакция. Разрывы цепочек ДНК сперматозоидов заполняются флуоресцирующим меченым нуклеотидом. Это видно под микроскопом, когда сперматолог считает сперматозоиды с фрагментированной ДНК.

Еще 2-3 года назад TUNEL-тест использовался повсеместно. Однако это был долгий и трудоемкий в выполнении тест. Сейчас более чувствительным и информативным считается тест HALO, что подтверждается клиническими исследованиями. А срок выполнения по сравнению с TUNEL сократился в 5-7 раз.

HALO-тест – это полная альтернатива тесту TUNEL. Новый тест быстрее и эффективнее. Поэтому мы рекомендуем использовать именно его. Однако не все андрологи и репродуктологи обадают информацией о HALO и требуют от пациентов результатов TUNEL-теста. Поэтому мы оставили TUNEL в списке услуг лаборатории.

Сдать анализ на фрагментацию ДНК (HALO): адрес, цена, сроки лаборатории.

HALO – это исследование, которое лучше выполнять в специализированной лаборатории, где работают сперматологи и эмбриологи, а не обычные лаборанты , соблюдаются международные стандарты проведения исследований и принципы доказательной медицины. Андрологи и репродуктологи не доверяют результатам сетевых лабораторий.

Читайте также:
Синуфорте - препарат для лечения воспалительных заболеваний слизистой носа

Сдать сперму для проведения HALO можно в лаборатории сперматологии Sperma-test.ru.
Стоимость HALO-теста (альтернатива TUNEL) – 8050 р.
Адрес лаборатории где можно сдать анализ:

Адрес: г.Москва ул.Беговая д.7
м.Беговая
Лаборатория сперматологии СПЕРМА-ТЕСТ

Записаться на прием и задать вопрос можно по телефону: +7 495 199-7554

О лаборатории

Специализированная лаборатория сперматологии
Высокий профессиональный уровень, наличие собственной сертифицированной лаборатории, применение инновационных лечебно-диагностических технологий.
Услуги и цены

Часы работы лаборатории
Пн – Пт 08:00-18:45
Сб – Вс 09:00-13:30
Технический перерыв: 13:30 – 15:45
Запись по телефону: Пн – Вс 09:00-20:00

НАШИ СПЕЦИАЛИСТЫ

Все доктора и сотрудники лаборатории сперматологии имеют высокую квалификацию и многолетний опыт работы.

Анализ на фрагментацию ДНК сперматозоидов поможет родить ребенка

Когда случаются выкидыши или замирает беременность, чаще все списывают на слабое здоровье женщины. Но это не так. Эмбрион может не прижиться из-за генетических дефектов сперматозоидов. По этой же причине возможно и мужское бесплодие. Хорошая новость в том, что сегодня такую «поломку» можно своевременно выявить и благоприятно повлиять на ситуацию.

Для этого врачи рекомендуют сдать анализ на фрагментацию ДНК сперматозоидов. Кому точно стоит пройти это исследование и как изменить свою жизнь, чтобы наконец стать родителями, разбираемся со Светланой Жуковской, ассистентом кафедры акушерства и гинекологии Белгосмедуниверситета, сотрудником «Центра репродуктивной медицины».

Что показывает анализ?

По большому счету самое важное в сперматозоиде – это генетический материал. Но из-за различных негативных факторов ДНК сперматозоидов может «ломаться». Происходит ее фрагментация, нарушение целостности, по сути, мутация. Если такой поврежденный сперматозоид попадет в яйцеклетку, зачатие может наступить, но из-за генетических дефектов эмбрион будет нежизнеспособным: беременность замрет на ранних сроках, или случится выкидыш. Фрагментация ДНК сперматозоидов может быть и причиной мужского бесплодия. Стандартная спермограмма не показывает генетическую полноценность сперматозоидов, поэтому ее может быть недостаточно, чтобы разобраться в глубинных причинах проблемы. Анализ показывает, сколько процентов сперматозоидов имеют дефектную ДНК. Считается, что если процент фрагментированной ДНК меньше 25, сперма фертильная, то есть все хорошо. Если показатель превышает 25 %, уже могут быть проблемы с зачатием и вынашиванием. Чем показатель фрагментации ниже, тем лучше. Но важно понимать, что не существует мужчин с нулевой фрагментацией. Не нужно раньше времени паниковать, увидев в анализе генетические «поломки», результаты должен трактовать врач.

Кому показан анализ?

Поводом для исследования могут стать:

* Мужское бесплодие с неустановленной причиной (идиопатическое бесплодие). По статистическим данным, от 15 % до 40 % мужчин с такой формой бесплодия имеют ДНК-фрагментацию.

* Неудачные попытки инсеминации и ЭКО.

* Варикоцеле (варикозное расширение вен семенного канатика, что приводит к нарушению венозного оттока и перегреву сперматозоидов).

Также нельзя сбрасывать со счетов влияние факторов риска, уточняет эксперт.

Что это за факторы риска?

В нашем обществе принято считать, что у женщины качество яйцеклеток ухудшается после 35 лет, а мужчина сохраняет фертильность на протяжении всей жизни. Но современные исследования говорят о том, что к 40 годам генетическое качество сперматозоидов тоже падает. Поэтому если потенциальный отец уже в зрелом возрасте, лучше провериться. Среди вредных привычек основной фактор риска – курение, потому что в табачном дыме содержатся тяжелые металлы, которые напрямую разрушают качество спермы. Длительное воздержание также может ухудшать генетическую полноценность сперматозоидов. В 2017 году было проведено масштабное исследование, которое доказало, что воздержание более 5 дней вызывает повышение фрагментации ДНК сперматозоидов.

В Беларуси около 20% пар сталкиваются с бесплодием. Ежегодно у более 5000 женщин случаются выкидыши. Современные исследования говорят о том, что в бесплодии мужской фактор равнозначен женскому, поэтому обследоваться нужно обоим и одновременно.

Среди других факторов риска ожирение, сахарный диабет, инфекционные и онкологические заболевания, профессиональные вредности – работа со свинцом, кадмием и другими токсинами. А также постоянный перегрев. Поэтому ношение узкого белья и обогрев сиденья машины тоже негативно влияют на качество сперматозоидов.

Читайте также:
Показания, правила подготовки и этапы сбора анализа кала на скрытую кровь. Анализ кала на скрытую кровь - как проводят исследования

Если эти риски присутствуют, лучше сделать анализ заранее, чтобы успеть откорректировать образ жизни и избежать проблем в будущем.

Можно ли вылечить разрыв ДНК сперматозоидов?

Фрагментация ДНК – сложный процесс, и как-то целенаправленно повлиять на него мы не можем, лекарств от этого тоже пока нет. Но мы можем устранить факторы риска и тем самым повысить генетическое качество спермы. Например, если это варикоцеле, необходимо сделать операцию. Доказано, что после операции качество сперматозоидов улучшается.

Отказаться от курения, нормализовать массу тела, избежать контакта с токсинами, пищевым пластиком BPA, хорошо питаться, полноценно спать, вести регулярную половую жизнь – все это в силах человека.

Для улучшения спермы врачи сегодня активно назначают антиоксидантные комплексы: витамины А, С, Е, селен и пр. Но в 2018 году Европейское общество репродукции человека и эмбриологии провело большое исследование – и оказалось, что существенной разницы между антиоксидантами и плацебо нет. Эти комплексы не повредят, но значительно улучшить качество спермы не смогут, подчеркивает эксперт.

Чем помогут репродуктологи?

Если показатели фрагментации пограничные, около 27–28 %, мы даем рекомендации по нормализации образа жизни, назначаем некоторые физиопроцедуры. Например, хороший эффект дает курс процедур в барокамере. Если же мы видим, что процент разрывов ДНК сперматозоидов высокий, лучше не терять времени и попробовать манипуляции, которые смогут помочь. В первую очередь можно попробовать ИКСИ. Этот метод лечения бесплодия позволяет «словить» сперматозоид и поместить его прямо в цитоплазму яйцеклетки. Также можно сделать тестикулярную биопсию – забор сперматозоидов непосредственно из тканей яичка. В этом нет ничего страшного, операция делается под наркозом и позволяет получить сперматозоиды лучшего качества. Это приносит хорошие результаты. Недавно в нашем Центре был пациент со сниженной концентрацией спермы и выраженной ДНК-фрагментацией. Мы сделали ему тестикулярную биопсию, получили несколько качественных сперматозоидов (хотя в норме их концентрация должна измеряться в миллионах), использовали их для процедуры ИКСИ и получили долгожданный результат. Хочу подчеркнуть для мужчин, что ДНК-фрагментация – это не врожденная патология. То есть сперматозоиды вырабатываются качественные, просто в процессе созревания и транспортировки они могут «ломаться». Но это исправимо!

Как происходит забор спермы для анализа?

Материал сдается точно так же, как при стандартной спермограмме – путем мастурбации в стерильную емкость. Это делается непосредственно в клинике, потому что важно соблюдение температурного режима и стерильности. В Центре репродуктивной медицины, к примеру, комната для сдачи анализа напрямую соединена окошком с лабораторией.

Перед сдачей анализа мужчина должен быть здоров, не принимать антибактериальные и противовирусные препараты, в течение недели не употреблять спиртное, 1–2 дня соблюдать половой покой.

Читайте также:
Упражнения после артроскопии коленного сустава резекция мениска

Анализ на фрагментацию ДНК сперматозоидов делается несколько рабочих дней. Если есть необходимость получить результаты максимально быстро, это возможно за несколько часов. Все зависит от цели сдачи.

ДНК-фрагментация сперматозоидов

spermatozoidi.jpg

К настоящему времени известно, что для выявления нарушений мужской фертильности наиболее оптимальным является проведение различных исследований эякулята в комплексе. Так, например, при оценке спермограммы определяют количество и подвижность мужских половых клеток, МАР-тест позволяет определить иммунологические нарушения у мужчины, а при оценке строгой морфологии видны нарушения строения сперматозоидов.

Кроме того, существуют и другие относительно новые, но чрезвычайно информативные методы оценки сперматозоидов. Одним из таких методов является тест на фрагментацию ДНК, с помощью которого можно определить степень разрывов в молекуле ДНК спермиев, что часто приводит к остановке развития эмбриона на любом сроке. Помимо этого, установлено, что, в семейных парах, где у мужчин наблюдается повышенный индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, потеря беременности на ранних сроках (до 12 недель) встречается намного чаще, чем в парах с нормальным индексом фрагментации. Своевременное обнаружение и дальнейшая коррекция индекса ДНК-фрагментации с помощью специальной терапии увеличивает шанс наступления и нормального протекания естественной беременности, а также значительно повышает вероятность получить долгожданную беременность с помощью метода ЭКО с первой попытки.

В Красноярском центре репродуктивной медицины анализ оценки фрагментации ДНК сперматозоидов выполняется с 2010 года. За все это время специалисты нашего центра помогли стать счастливыми родителями многим семьям, за период с сентября 2010 по настоящее время у нас родилось более 2500 малышей. Однако хотелось бы остановиться на конкретной истории, в которой благодаря комплексному подходу к оценке эякулята, включая анализ ДНК-фрагментации, удалось достичь главной цели нашей клиники – рождения в семье здорового ребенка. В 2010 году в Красноярский центр репродуктивной медицины обратилась молодая супружеская пара, женщине – 31 год, мужчине – 29 лет. В данной семье беременность не наступала по причине мужского фактора, а именно, было снижено количество прогрессивно-подвижных сперматозоидов в спермограмме, МАР-тест отрицательный, 4% нормальных морфологических форм (по Крюгеру), индекс фрагментации ДНК – 39%. По результатам комплексного исследования эякулята мужчине была предложена метаболическая терапия, которую супружеская пара проходить отказалась вследствие непонимания значимости данного лечения для процедуры ИКСИ. В результате из 11 зрелых ооцитов оплодотворение наступило только у 4 клеток. На 5 сутки развития был выполнен перенос двух эмбрионов, эмбрионы демонстрировали отставание в развитии, оставшиеся после переноса эмбрионы не были пригодны для криоконсервации, результат – отрицательный (рис.1).

рис_1.jpg

Рис.1. Эмбрионы, выбранные для переноса на 5 сутки развития (эмбрионы отстают в развитии, отмечается небольшое количество клеток в составе эмбриона, наличие фрагментации).

По результатам лечебного цикла мужчине снова была предложена метаболическая и антиоксидантная терапия, которая в дальнейшем была им успешно пройдена, т.е. удалось скорректировать число морфологически нормальных форм сперматозоидов и индекса ДНК-фрагментации практически до нормальных значений (22%). В дальнейшем пара снова обратилась в клинику для повторной попытки ЭКО+ИКСИ. Во второй попытке из 22 зрелых ооцитов оплодотворение наступило у 18 клеток, на 5 сутки развития был выполнен перенос двух эмбрионов хорошего качества (эмбрионы соответствовали сроку развития, хорошие морфологические характеристики), дополнительно произведена криоконсервация двух эмбрионов (рис.2). Результат – одноплодная беременность, роды произошли в срок и наши пациенты стали родителями прекрасного мальчика.

рис_2.jpg

Рис.2. Эмбрионы на 5 сутки развития (эмбрионы соответствуют дню развития, хорошая клеточная масса в составе эмбриона, отсутствие фрагментации).

Ссылка на основную публикацию